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Western Blot Ladder Pen常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法
更新時(shí)間:2022-03-07 點(diǎn)擊量:1541

   

 

Western Blot Ladder Pen

目錄號(hào):K2502

 

保存條件:4℃保存。

 

規(guī)格說(shuō)明:1

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

  蛋白免疫印跡(WB)是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法,經(jīng)常用于檢測(cè)抗體和抗原之間的特異性,而且能夠?qū)δ康牡鞍走M(jìn)行定性或定量分析研究。但是在試驗(yàn)中,抗原或者抗體往往都不是單一的成分,這些可能會(huì)導(dǎo)致在最終底片曝光出多條條帶,或出現(xiàn)一些不明分子量的條帶,或者目的條帶的位置都不能確定。因此確定這些條帶的分子量對(duì)我們進(jìn)行下一步的分析就顯得非常重要。

  目前,市場(chǎng)上有一些預(yù)染Marker,能很好監(jiān)測(cè)我們的轉(zhuǎn)膜效率,電泳轉(zhuǎn)膜后能在雜交膜上看到Marker相應(yīng)的條帶,但是這些Marker 最終不能在底片上曝出條帶。

  Western Blot Ladder Pen 正是要為您解決這個(gè)問(wèn)題,通過(guò)轉(zhuǎn)膜后對(duì)著預(yù)染Marker或經(jīng)過(guò)麗春紅染色確定的非預(yù)染Marker的各條帶進(jìn)行相應(yīng)的標(biāo)記,最終這些筆跡都能在目的位置曝光出相應(yīng)的條帶,用作分子量標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)也可以用它在膜上做其它標(biāo)記,或者用作陽(yáng)性對(duì)照。

 

注意事項(xiàng)

 

1.本產(chǎn)品適用于HRP底物系統(tǒng)。

2WB Ladder Pen使用完成后,請(qǐng)水平放置于4℃,請(qǐng)勿凍存于-20℃。

3.使用前請(qǐng)先將WB Ladder Pen在紙上畫(huà)幾筆之后再在膜上做相應(yīng)的標(biāo)記。

4.標(biāo)記過(guò)程中請(qǐng)勿用力太大,以免破壞膜的結(jié)構(gòu),輕劃即可。

5.隨著筆使用時(shí)間的增加,信號(hào)可能會(huì)逐漸減弱。

                本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途

 

操作步驟

 

    1.電泳的過(guò)程中,可以使用預(yù)染蛋白Marker或者非預(yù)染蛋白Marker。

    2.常規(guī)的轉(zhuǎn)膜后,將膜取下。

       a  使用預(yù)染蛋白MarkerNC膜:去離子水漂洗膜后,使用上下兩層濾紙或者衛(wèi)生紙吸掉膜上多余的液體(請(qǐng)勿將膜吸的過(guò)干)。

       b  使用非預(yù)染蛋白MarkerNC膜:麗春紅染膜后,用鉛筆將非預(yù)染蛋白Marker的各個(gè)條帶標(biāo)記。TBST漂洗膜,以*去掉膜上的麗春紅,使用上下兩層濾紙或者

       衛(wèi)生紙吸掉膜上多余的液體(請(qǐng)勿將膜吸的過(guò)干)。

    3.使用WB Ladder Pen在膜上做好相應(yīng)的標(biāo)記(輕劃即可),放置15秒之后將膜放置

       于封閉液中封閉。

    4.按常規(guī)步驟進(jìn)行后續(xù)的WB試驗(yàn)。

    

問(wèn)題及解決方法

 

              問(wèn)題                             推薦解決方法

                                             1. 減少曝光時(shí)間。

              信號(hào)太強(qiáng)

                                             2. 同時(shí)多壓幾張底片。

                                             1. 換一支新的筆。

              


        沒(méi)有信號(hào)或者信號(hào)太弱

                                             2. 標(biāo)記時(shí)在對(duì)應(yīng)位置多劃幾筆。

 


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